Комплет ForeDirect RT-qPCR
Опис на комплет:
◮За РНК директно засилување во реално време од збирки брис без процеси на прочистување на РНК.Овој комплет ги комплетира циклусите qRT-PCR во рок од еден час.Ензимската мешавина е оптимизирана мешавина на обратна транскриптаза, Hot-Start Taq DNA полимераза, инхибитор на RNase.Реакциониот бафер ги содржи сите потребни компоненти, вклучувајќи ги и оптимизираните тампон компоненти, Mg2+, dUTP и dNTP.
Опис
Комплетот ForeDirect RT-qPCR е дизајниран за директно засилување на РНК во реално време од збирки брисеви без процеси на прочистување на РНК.Овој комплет ги комплетира циклусите qRT-PCR во рок од еден час.Ензимската мешавина е оптимизирана мешавина на обратна транскриптаза, Hot-Start Taq DNA полимераза, инхибитор на RNase.Реакциониот бафер ги содржи сите потребни компоненти, вклучувајќи ги и оптимизираните тампон компоненти, Mg2+, dUTP и dNTP.
Спецификации
100 Т
Компоненти на комплетот
| Средство за ослободување на нуклеинска киселина |
| РНК заштитник |
| 2× RT-qPCR пуфер |
| Ензимска мешавина (Taq&M-MLV) |
| Инструкции |
Примена на PCR
1. Откако цевките за реакција на PCR накратко ќе се центрифугираат, ставете ги во резервоарот за примерок на инструментот за засилување.
2. Термички протокол
| Чекор | Температура | Време | Циклуси | |
| 1 | Обратна транскрипција | 50 ℃ | 15 мин | 1 |
| 2 | Пред денатурација | 95 ℃ | 1 мин | 1 |
| 3 | Денатурација | 95 ℃ | 10 секунди | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60 ℃ | 30 секунди | |
Забелешка:Флуоресцентниот сигнал беше откриен веднаш по чекорот на продолжување на секој циклус.
3. По поставувањето, зачувајте ја датотеката и стартувајте ја програмата за реакција.
Оперативни чекори
Пред подготовка на реагенсот, сите реагенси во комплетот треба да се одмрзнат на собна температура и нежно да се измешаат.
Подготовка на реагенс
1. Подгответе ја смесата за ослободување на нуклеинска киселина
| Компонента | Волумен по примерок или контрола |
| Средство за ослободување на нуклеинска киселина | 5 μL |
| РНК заштитник | 0,5 μL |
2. Подгответе ја мешавината за реакција
| Компонента | Волумен по примерок или контрола |
| 2× RT-qPCR пуфер | 15 μL |
| Ензимска мешавина (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Прајмери и сонди | 1 μL |
Складирање и рок на траење
-Комплетот треба да се чува на -20± 5℃.Рокот на важност е 12 месеци.
-Избегнувајте повторени циклуси на замрзнување-одмрзнување (<5 циклуси).
