Комплет за изолација на животинска вкупна РНК Комплет за екстракција и прочистување на тотална РНК за животински ткива и клетки
Опис на комплет:
Брзо и ефикасно извлекување на вкупна РНК со висока чистота и висок квалитет од различни животински ткива.
Нема потреба да се грижите за деградацијата на РНК.Целиот систем е без RNase
Ефикасно отстранете ја ДНК со помош на колона за чистење на ДНК
Отстранете ја ДНК без додавање на DNase
Едноставно - сите операции се завршуваат на собна температура
Брзо - операцијата може да се заврши за 30 минути
Безбедно - не се користи органски реагенс
Висока чистота - OD260/280≈1,8-2,1
Описи на комплети
50 подготовки, 200 подготовки
Овој комплет го користиспин колона и формуларазвиена од нашата компанија, која може да извлече висока чистота и висококвалитетна вкупна РНК од различни животински ткива со висока ефикасност. Обезбедува ефикасна колона за чистење на ДНК, која лесно може да ја одвои и адсорбира геномската ДНК од супернатантот и ткивниот лизат, едноставна и заштедува време;Колона само за РНК може ефикасно да врзе РНК и може да се обработува истовремено со единствена формула Многу примероци.
Целиот систем е без RNase, така што извлечената РНК не се разградува;Бафер RW1, пуфер RW2 систем за миење пуфер, така што добиената РНК нема загадување од протеини, ДНК, јони и органски соединенија.
Компоненти на комплетот
| Комплет за изолација на тотална РНК на животните | ||
| Компоненти на комплетот | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 Т | 200 Т | |
| Бафер RL1* | 25 мл | 100мл |
| Бафер RL2 | 15 мл | 60 мл |
| Бафер RW1* | 25 мл | 100мл |
| Бафер RW2 | 24 мл | 96 мл |
| ddH2O без RNase | 10 мл | 40 мл |
| Колона само за РНК | 50 | 200 |
| Колона за чистење на ДНК | 50 | 200 |
| Упатство за употреба | 1 парче | 1 парче |
Информација за продуктот
| Формат | Спин колона | Компонента за прочистување | Колона Foregene, реагенс |
| Флукс | 1-24 примероци | Време на подготовка | ~ 30 мин (24 примероци) |
| Центрифуга | Биро центрифуга | Одвојување со пиролиза | Центрифугално одвојување |
| Пример | Животинско ткиво;ќелија | Количина на примероци | Ткиво: 10-20 mg;Ќелија:(1-5)×106 |
| Волумен на елуција | 50-200 μL | Максимален волумен на вчитување | 850 μL |
Карактеристики и предности
■ Нема потреба да се грижите за деградација на РНК;целиот систем е без RNase
■ Ефикасно отстранете ја колоната за чистење на ДНК што користи ДНК
■ Отстранете ја ДНК без додавање на DNase
■ Едноставни-сите операции се завршуваат на собна температура
■ Брзата работа може да се заврши за 30 минути
■ Безбеден - не е потребен органски реагенс
■ Висока чистота -OD260/280≈1,8-2,1
Апликација за комплет
Погоден е за екстракција и прочистување на вкупната РНК од различни свежи или замрзнати животински ткива или култивирани клетки.
Параметри на производот
■ Надолни апликации: синтеза на cDNA на првата жичка, RT-PCR, молекуларно клонирање, Northern Blot итн.
■ Примероци: животински ткива, култивирани клетки
■ Дозирање: Ткива 10-20 mg, клетки(2-5)×106
■ Максимален капацитет за врзување на ДНК на колоната за прочистување: 80 μg
■ Волумен на елуција: 50-200 μl
Дијаграм
Комплет за изолација на животинска вкупна РНК третиран 20 mg
Свежи примероци од глушец, земете 5% прочистен вкупен РНК 1% агар
Електрофореза со гликогел
1: Слезина 2: Бубрег
3: Црн дроб 4: Срце
Складирање и рок на траење
Комплетот може да се чува 24 месеци на собна температура (15–25 ℃) или 2–8 ℃ подолго време.Пуфер RL1 може да се чува на 4 ℃ 1 месец по додавањето β-меркаптоетанол (опционално).
Цитирани статии
1.IF: 18.808:Женг, К., Чин, Ф., Луо, Р., и сор.Наночестички слични на липиди со mRNA за уредување на базата на црниот дроб преку оптимизација на централниот композитен дизајн.Adv.Функција.Матер.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF: 18.187:Хе Х, Хонг В, Јанг Ј и сор.Спонтаната апоптоза на клетките при подготовка на терапевтски матични клетки врши имуномодулаторни ефекти преку ослободување на фосфатидилсерин.Цел на сигналниот трансдукт Тер.2021 јули 14; 6 (1): 270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.АКО: 17.97: Даи З, Лиу Х, Лиао Ј и др.Модификацијата на tRNA на N7-метилгуанозин го подобрува транслацијата на онкогена мРНК и ја промовира прогресијата на интрахепатичниот холангиокарцином.Мол клетка.2021 јули 29: S1097-2765 (21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, и сор.Модификацијата m6A посредувана од Mettl14 ја олеснува регенерацијата на црниот дроб со одржување на хомеостазата на ендоплазматскиот ретикулум.Cell Mol Гастроентерол Хепатол.2021; 12 (2): 633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
Сетови за изолација на РНК за други примероци извориСе достапни:
Клеточна, растителна, вирусна, крвна итн.
РНК не се екстрахира или приносите на РНК се ниски
Често има различни фактори кои влијаат на ефикасноста на обновувањето, како што се: содржината на RNA примерок од ткиво, начинот на работа, волуменот на елуцијата итн.
1. Ледена бања или криогена (4 °C) центрифугирање беше извршена за време на работата.
Препорака: Работете на собна температура (15-25 ° C) во текот на целиот процес, не правете ледена бања и центрифугирајте на ниски температури.
2. Неправилно зачувување на примерокот или прекумерно време на складирање на примерокот.
Препорака: Чувајте ги примероците на -80 °C или замрзнете ги во течен азот и избегнувајте повеќекратна употреба за замрзнување-одмрзнување;обидете се да користите свежо ткиво или култивирани клетки за екстракција на РНК.
3. Недоволна лиза на примерокот.
Препорака: При хомогенизирање на ткивото, проверете дали ткивото е доволно хомогенизирано и дека ткивните клетки се доволно поделени за да се објасни ослободувањето на РНК.
4. Елуентот не е правилно додаден.
Препорака: Потврдете дека ddH без RNase2O се додава по капка во средината на мембраната на колоната за прочистување.
5. Точниот волумен на апсолутен етанол не беше додаден во пуфер RL2 или пуфер RW2.
Препорака: Следете ги упатствата, додајте го точниот волумен на апсолутен етанол во Buffer RL2 и Buffer RW2 и добро измешајте пред да го користите комплетот.
6. Дозата на примерок од ткиво не е соодветна.
Препорака: Користете 10-20 mg ткиво или (1-5) × 106клетки на 500 μl пуфер RL1, бидејќи прекумерната употреба на ткиво може да резултира со намалена екстракција на РНК.
7. Несоодветен волумен на елуирање или нецелосно елуирање.
Препорака: Волуменот на елуција на колоната за прочистување е 50-200 μl;ако ефектот на елуција не е задоволителен, се препорачува да се продолжи времето на поставување на собна температура по додавање на претходно загреан ddH без RNase2О, на пр. 5-10 мин.
8. Колоната за прочистување има остатоци од етанол по миењето со пуфер RW2.
Препорака: Ако има остатоци од етанол по миењето со пуфер RW2, центрифугирање на празна цевка за 1 мин, времето за операција на центрифугирање на празна цевка може да се зголеми на 2 минути или колоната за прочистување може да се стави на собна температура 5 минути за соодветно да се отстрани преостанатиот етанол.
Прочистената РНК се разградува
Квалитетот на прочистената РНК е поврзан со фактори како што се зачувување на примерокот, контаминација со RNase и манипулација итн.
1. Примероците од ткивото не се чуваат навреме.
Препорака: Ако примероците од ткиво или клетките не се користат навремено по собирањето, веднаш да се криопрезервира на -80 °C или течен азот.За екстракција на РНК, користете ново земено ткиво или клеточен примерок секогаш кога е можно.
2. Повторено замрзнување-одмрзнување на примероци од ткиво.
Препорака: Кога складирате примероци од ткиво, најдобро е да ги исечете на мали парчиња за зачувување и да отстраните едно од парчињата кога ги користите за да избегнете повторено замрзнување-одмрзнување на примерокот и разградување на РНК.
3. За време на операцијата се внесува RNase или не се носат ракавици за еднократна употреба, маски итн.
Препорака: Експериментите за екстракција на РНК најдобро се изведуваат во посебни простории за манипулација со РНК и табелата се брише пред експериментот.
Носете ракавици и маски за еднократна употреба за време на експериментот за да ја минимизирате деградацијата на РНК предизвикана од воведувањето на RNase.
4. Реагенсите се контаминирани со RNase за време на употребата.
Препорака: Заменете го со нов комплет за изолација на тотална РНК на животните за поврзани експерименти.
5. Цевките за центрифугирање, врвовите итн. што се користат при манипулација со РНК се контаминирани со RNase.
Препорака: Потврдете дека цевките за центрифуга, врвовите, пипетите итн. што се користат при екстракција на РНК се без RNase.
Прочистената добиена РНК влијае на низводните експерименти
РНК прочистена од колоната за прочистување, ако сол јони, содржината на протеини е премногу голема ќе влијае на низводно експеримент, како што се: обратна транскрипција, Северен Блот et al.
1. Елуираната РНК има остатоци од сол јони.
Препорака: Потврдете дека точниот волумен на етанол е додаден во баферот RW2 и изведете 2 миење на колоната за прочистување со центрифугалната брзина назначена за работа;ако има остатоци од јонски сол, оставете ја колоната за прочистување во пуфер RW2 5 минути на собна температура и направете центрифугирање за да се максимизира отстранувањето на контаминацијата со сол.
2. Остаток од етанол во елуирана РНК.
Препорака: Потврдете дека по миењето со тампон RW2, извршете ја операцијата на центрифугирање на празната цевка со брзината на центрифугирање наведена за работа, зголемете го времето на операцијата на центрифугирање на празната цевка на 2 минути ако сè уште има остатоци од етанол или оставете го на собна температура 5 минути по центрифугирањето на празната цевка за да се максимизира отстранувањето на туетанолот.
