Антителата, исто така наречени имуноглобулини (Ig), се гликопротеини кои специфично се врзуваат за антигени.
 
Конвенционалната подготовка на антитела се произведува со имунизација на животните и собирање антисерум.Затоа, антисерумот обично содржи антитела против други неповрзани антигени и други протеински компоненти во серумот.Општите антигенски молекули претежно содржат повеќе различни епитопи, така што конвенционалните антитела се исто така мешавина на антитела против повеќе различни епитопи.Дури и конвенционалните серумски антитела насочени против истиот епитоп сè уште се составени од хетерогени антитела произведени од различни клонови на Б-клетките.Затоа, конвенционалните серумски антитела се нарекуваат и поликлонални антитела или накратко поликлонални антитела.
 
Моноклонално антитело (моноклонално антитело) е високо униформно антитело произведено од еден клон на Б-клетки и насочено само против специфичен епитоп.Обично се подготвува со технологија на хибридома - технологијата на антитела на хибридома се заснова на технологија за фузија на клетки, комбинирајќи Б-клетки со способност да лачат специфични антитела и клетки на миелом со бесконечен капацитет на раст во хибридоми на Б-клетките.Оваа хибридома клетка има карактеристики на матична клетка.Може да се размножува бесконечно и бесмртно ин витро како клетките на миеломот и може да синтетизира и лачи специфични антитела како спленичните лимфоцити.Преку клонирање, може да се добие моноклонална линија добиена од една хибридомска клетка, односно клеточна линија на хибридома.Антителата што ги произведува се високо хомогени антитела против истата антигенска детерминанта, односно моноклонални антитела.
 
Антителата постојат како еден или повеќе мономери во форма на Y (т.е. моноклонални антитела или поликлонални антитела).Секој мономер во форма на Y е составен од 4 полипептидни синџири, вклучувајќи два идентични тешки синџири и два идентични лесни синџири.Лесниот и тежок синџир се именувани според нивната молекуларна тежина.Врвот на структурата во облик на Y е променливата област, која е местото за врзување на антигенот.(Извадок од концептот за био-моноклонални антитела Detai)
 
Структура на антитела
Тежок ланец
Постојат пет типа тешки ланци на Иг кај цицачите, именувани со грчките букви α, δ, ε, γ и μ.Соодветните антитела се нарекуваат IgA, IgD, IgE, IgG и IgM.Различни тешки синџири се разликуваат по големина и состав.α и γ содржат приближно 450 амино киселини, додека μ и ε содржат приближно 550 амино киселини.
Секој тежок ланец има два региони: константен регион и променлив регион.Сите антитела од ист тип имаат ист константен регион, но постојат разлики помеѓу антителата од различни типови.Константните региони на тешките синџири γ, α и δ се составени од три Ig домени во тандем, со шарки за да се зголеми неговата флексибилност;константните региони на тешките синџири μ и ε се составени од 4 Ig домени.Променливиот регион на тешкиот ланец на антителото произведен од различни Б-клетки е различен, но променливиот регион на антителото произведен од истата Б-клетка или клеточен клон е ист, а променливиот регион на секој тежок ланец е во должина од околу 110 амино киселини., И формирајте единствен Иг домен.
 
Лесен синџир
Постојат само два вида лесни ланци кај цицачите: тип ламбда и тип капа.Секој лесен синџир има два поврзани домени: константен регион и променлив регион.Должината на лесниот ланец е околу 211-217 амино киселини.Двата лесни синџири содржани во секое антитело се секогаш исти.За цицачите, лесниот ланец во секое антитело има само еден вид: капа или ламбда.Кај некои пониски 'рбетници, како што се 'рскавичните риби ('рскавични риби) и коскените риби, се среќаваат и други видови лесни синџири како што е типот јота (јота).
 
Fab и Fc сегменти
Сегментот Fc може директно да се комбинира со ензими или флуоресцентни бои за означување на антителата.Тоа е делот каде што антителото се заковува на плочата за време на процесот на ELISA, а исто така е дел каде што второто антитело се препознава и врзува во имунопреципитација, имуноблотирање и имунохистохемија.Антителата може да се хидролизираат во два F(ab) сегменти и еден Fc сегмент со протеолитички ензими како што е папаинот, или тие може да се скршат од регионот на шарката со пепсин и да се хидролизираат во еден F(ab)2 сегмент и еден Fc сегмент.Фрагментите на IgG антитела понекогаш се многу корисни.Поради недостаток на Fc сегментот, сегментот F(ab) нема да се таложи со антигенот, ниту пак ќе биде заробен од имуните клетки во in vivo студиите.Поради малите молекуларни фрагменти и недостатокот на функција на вкрстено поврзување (поради недостаток на Fc сегмент), Fab сегментот обично се користи за радиоозначување во функционалните студии, а сегментот Fc главно се користи како блокирачки агенс во хистохемиското боење.
 
Променливи и константни региони
Променливиот регион (V регион) се наоѓа на 1/5 или 1/4 (содржи околу 118 амино киселински остатоци) од H ланецот во близина на N-крајот и 1/2 (содржи околу 108-111 аминокиселински остатоци) во близина на N-крајот на L синџирот.Секој V регион има пептиден прстен формиран од дисулфидни врски внатре во синџирот, а секој пептиден прстен содржи приближно 67 до 75 остатоци од аминокиселини.Составот и распоредот на амино киселините во регионот V ја одредуваат специфичноста на врзување на антигенот на антителото.Поради постојано менување на типовите и секвенцата на амино киселините во регионот V, може да се формираат многу видови на антитела со различни специфичности на врзувачки антиген.V регионите на ланецот L и H синџирот се нарекуваат VL и VH, соодветно.Во VL и VH, составот на аминокиселините и низата на некои локални региони имаат повисок степен на варијација.Овие региони се нарекуваат хиперпроменливи региони (HVR).Составот на аминокиселините и распоредот на деловите кои не се HVR во регионот V се релативно конзервативни, што се нарекува рамковен регион.Постојат три хиперпроменливи региони во VL, обично лоцирани на остатоци од аминокиселини од 24 до 34 и 89 до 97 соодветно.Трите HVR на VL и VH се нарекуваат HVR1, HVR2 и HVR3, соодветно.Истражувањето и анализата на рендгенската кристална дифракција докажаа дека хиперпроменливата област е навистина местото каде што се врзува антигенот на антителата, па затоа се нарекува регион што одредува комплементарност (CDR).HVR1, HVR2 и HVR3 на VL и VH може да се наречат CDR1, CDR2 и CDR3 соодветно.Општо земено, CDR3 има повисок степен на хиперваријабилност.Хиперваријабилниот регион е исто така главната локација каде што постојат идиотипните детерминанти на молекулите на Ig.Во повеќето случаи, ланецот H игра поважна улога во врзувањето за антигенот.
Константен регион (регион C)се наоѓа на 3/4 или 4/5 (приближно од аминокиселината 119 до C терминалот) на H ланецот во близина на C-крајот и 1/2 (содржи околу 105 аминокиселински остатоци) во близина на C-крајот на L синџирот.Секој функционален регион на H ланецот содржи околу 110 амино киселински остатоци и содржи пептиден прстен составен од 50-60 остатоци од аминокиселини поврзани со дисулфидни врски.Составот и распоредот на аминокиселините на овој регион се релативно константни во истото животинско Ig изотип L синџир и истиот тип H синџир.Истото, може само конкретно да се поврзе со соодветниот антиген, но структурата на неговиот C регион е иста, односно ја има истата антигеност.Секундарното анти-човечко IgG антитело на коњот (или анти-антитело) може да се комбинира со двете. Се појавува комбинација на антитела (IgG) против различни егзотоксини.Ова е важна основа за подготовка на секундарни антитела и примена на флуоресцеин, изотопи, ензими и други означени антитела.
 
 
Поврзани производи:
Комплет Cell Direct RT-qPCR