Методите на PCR и контаминацијата со аеросол со нуклеинска киселина во лабораториите за тестирање на нуклеинска киселина се како две страни на паричка.Можеме само да избереме да го имаме или не, но не можеме да избереме дали го сакаме или го трошиме.

1. Скрининг на отстранувач на ДНК

За да се постигне просторно отстранување на контаминацијата со аеросол со нуклеинска киселина, прво е неопходно да се отстранат отстранувачите на ДНК кои можат да ги отстранат нуклеинските киселини во течна состојба.Бидејќи нема многу отстранувачи на ДНК кои навистина функционираат.За експерименталниот метод погледнете на: Отстранувачот на ДНК не може да биде „таен агол“ на лабораторијата!

Во овој експеримент, 100 копии/μL (CT приближно 31) од ASFV плазмидот и отстранувачот на ДНК квантифицирани со дигитален PCR беа измешани во еднакви волумени, а потоа реагираа на собна температура 10 мин, 20 мин и 30 мин.По екстракција на нуклеинска киселина, беше извршено засилување на qPCR.Беше споредена позитивна контрола измешана со плазмид и вода.Бидејќи експериментот не беше завршен во исто време, може да има одредено отстапување помеѓу резултатите, но тоа не влијае на заклучокот на експериментот.Досега проценив 10 комерцијални производи за отстранување на ДНК.Само производите бр. 1, бр. 6 и бр. 8 можат ефикасно да ја разградат плазмидната ДНК во течна состојба.Другите производи немаат речиси никаков ефект.

Табела 1 Ефект на отстранување на нуклеинската киселина на комерцијално достапниот отстранувач на ДНК

2. Експериментот со ефект на отстранување на ДНК на најчесто користените средства за дезинфекција

1. Скрининг на најчесто користените средства за дезинфекција

Постојат многу видови на средства за дезинфекција кои вообичаено се користат во лабораториите: алдехиди, феноли, алкохоли, кватернерни амониумски соли, пероксиди, препарати од хлор и киселини и бази.Дезинфекциските ефекти на овие средства за дезинфекција врз микроорганизмите се целосно потврдени со експерименти, но нема доволно експериментални податоци за деградациониот ефект на нуклеинските киселини.На лабораториите за тестирање на нуклеинска киселина им треба средство за дезинфекција кое не само што има добар ефект на дезинфекција на микроорганизмите, туку може и да ја разгради ДНК.Резултатите од тестот покажуваат дека само два хлорни препарати од 84 средство за дезинфекција и трихлороизоцијанурична киселина и 1 М хлороводородна киселина ги исполнуваат барањата.Бидејќи 1 М хлороводородна киселина е многу корозивна, се препорачува хлорните препарати да се користат како отстранување на отпадот во лабораториите за тестирање на нуклеинска киселина.Сепак, препаратите со хлор се корозивни за металите и не можат да се користат за дезинфекција на инструменти и опрема.

Табела 2 Ефекти на отстранување на ДНК на различни видови средства за дезинфекција

2. Минималната ефективна концентрација на препарати на хлор

Средствата за дезинфекција базирани на хлор имаат силен ефект на деградација на ДНК, но поради нивната метална корозивност и иритација, тие можат да се користат за чистење на подот, неметалните површини, врвовите за натопување, цевките за центрифуга и други тестови.

Според „Новите технички упатства за дезинфекција на епидемија на коронарна пневмонија“: загадувачи (крв на пациенти, секрети и повраќање) достапен хлор 5 g/L-10g/L средство за дезинфекција што содржи хлор;подовите, ѕидовите и површините на предметите користат достапен хлор 1 g/L Хлорно средство за дезинфекција: облеката, постелнината и другиот текстил прво се натопуваат во средство за дезинфекција со хлор со 0,5 g/L достапен хлор 30 минути, а потоа се чистат како и обично.

Табела 3 Ефект на отстранување на ДНК на различни концентрации на средство за дезинфекција на хлор

Резултатите од тестот покажуваат дека: кога ефективната концентрација на хлор е поголема или еднаква на 1,2 g/L, средството за дезинфекција што содржи хлор може целосно да разгради 100 копии/μL плазмид кога се користи 5 минути.Кога делува 10 минути, 84 средство за дезинфекција со ефективна концентрација на хлор поголема или еднаква на 0,6 g/L може целосно да разгради 100 копии/μL плазмиди.

3. Експеримент за отстранување на воздухот загаден со аеросол на нуклеинска киселина

Како да се исчисти воздухот загаден со аеросоли на нуклеинска киселина?Повеќето мисли се да се создаде средина загадена со аеросол и потоа да се исчисти, или да се исчистат нуклеинските киселини по контаминацијата.За мене е бесмислен експеримент кој не може да се повтори и резултатите од експериментот не можат квантитативно да се анализираат, па затоа позајмив некои методи за дезинфекција на воздухот со средство за дезинфекција.Видете „ГБ27948-2020 Општи барања за средства за дезинфекција на воздухот“ и „Технички спецификации за дезинфекција“

1. Материјали за тестирање

1.1 Отстранувач на ДНК: Во овој експеримент, беа избрани два комерцијално достапни отстранувачи на ДНК 6 и 8 во Табела 1.

1.2 Тест плазмид: Имајќи предвид дека вредноста на КТ на повеќето лабораториски загадувања ќе биде повисока од 30, концентрацијата на плазмидот на генот ASFV што се користи овој пат е околу 100 копии/μL, а флуоресцентниот квантитативен PCR CT е околу 31,07.Додадете го плазмидот во памучното брисче и исушете го на воздух.

1.3 Тест инструмент: Инструментот за дезинфекција Bilingkehan KVBOX, кој е љубезно поддржан од Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., има одлични перформанси за дезинфекција на воздухот со средство за дезинфекција со водороден пероксид и може ефикасно да убие спори и други микроорганизми.

1.4 Простор за тестирање: затворен трансфер прозорец од околу 0,1 кубни метри.

2. Метод на тестирање

Количината на дезинфекција поставена на машината за дезинфекција е 10 ml, а концентрацијата е 100 ml/m3, што е многу повисока од „GB27948-2020 Општи барања за средства за дезинфекција на воздухот“: кога се користи дезинфекција со аеросолен спреј, количината на средство за дезинфекција треба да биде ≤10 ml/m3