Лабораториското тестирање започнува со собирање примероци, а собирањето примероци е најлесно да се занемари.Најважно за собирање примероци е да се избере точниот тип на примерок, да се користат соодветни алатки за земање примероци и да се изврши разумен транспорт и обработка.

I.Тип на примерок

Вообичаените типови примероци се како што следува:

Методот на земање примероци може да се однесува на техничките спецификации за мониторинг на животната средина на новиот коронавирус на земјоделскиот трговски (чаршија) пазар“:

1. Примероци од брисеви од грло, раце, облека и други предмети на практичарите: потребно е да се користи растворот за зачувување на вирусот во цевката за земање примероци од вирусот и целосно да се инфилтрира во памучните брисеви за земање примероци.Површината на земјата) постојано се нанесува и се исплакнува повеќе од 3 пати.Во исто време, потребно е да се изврши повеќеточка дистрибуирано земање примероци на површината на предметот што се зема примерок.

2. Мостри од брисеви од површината на храната: Мострите од храна не можат директно да се соберат.Храната што треба да се собере треба внимателно да се одвои и да се чува во чиста кеса за земање примероци пред да се соберат примероци од брис.Потребно е да се користи растворот за зачувување на вирусот во цевката за земање примероци од вирусот, по целосно натопување на памучното брисче за земање примероци, за постојано размачкување и плакнење на површината на примерокот од храната што треба да се собере повеќе од 3 пати.Во исто време, потребно е да се изврши повеќеточка дистрибуирано земање мостри на површината на примерокот.

3. Мостри од отпадни води: Според дистрибуцијата на системот за одводнување на пазарот, изберете 2-3 локации за земање примероци од отпадни води, фокусирајќи се на собирањето на внатрешната мрежа на цевки, низводно од насоката на протокот на вода или поврзувањето со општинската цевководна мрежа.За да соберете примерок од брис, потопете го во канализацијата со памук за земање примероци за да ја адсорбира отпадната вода и исплакнете ја во цевката за земање примероци повеќе од 3 пати.За собирање примероци од отпадни води, користете полиетиленски пластични шишиња за собирање примероци од 30-500 mL отпадна вода;за собирање отпадни води со волумен поголем од 500 mL, може да се користат полиетиленски пластични кофи или специјална опрема за збогатување на примерок од вода на лице место.Во исто време, неопходно е да се спроведе повеќеточка дистрибуирано земање мостри за локацијата за земање примероци од отпадни води.

4. Примероци од животни: За живи животни, брисевите за земање мостри може да се користат за собирање брисеви од површината на телото, брисеви од орофарингеални и анални брисеви, а примероците од измет или секрет, исто така, може да се соберат и соодветно да се запишат на листот за евиденција.За примероци од животинско потекло кои биле подложени на дерење итн., користете памучни брисеви за да ги соберете примероците од површината на телото и брисевите од телесната празнина.Потребно е да се користи растворот за зачувување на вирусот во цевката за земање примероци од вирусот за целосно да се инфилтрира во памучното брисче за земање примероци, а потоа да се повтори нанесувањето на површината на примерокот од храната што треба да се собере.Шабу повеќе од 3 пати.Во исто време, потребно е да се изврши повеќеточка дистрибуирано земање мостри на површината на примерокот.

5. Други апарати: контејнери за транспорт и одгледување животни како кафези или резервоари за риби.Прво, набљудувајте ги или разберете ги специфичните видови животни складирани и одгледувани во контејнерот и соберете примероци од брис на внатрешниот ѕид на садот или течни примероци од содржината.

6. Соберете примероци од аеросол во области каде што се собираат луѓе, слабо проветрени локални трговски области, канцеларии и простории за одмор.

II.Алатки за земање примероци
1. Цевка за собирање крв
Ако подоцна треба да направите тестирање на нуклеинска киселина и примероци од антикоагуланси, се препорачува да користите вакуум крвен сад кој содржи ЕДТА антикоагулант за собирање крв;за примероци од серум, се препорачува да се користи вакуум крвен сад без антикоагулант.

2. брис за земање мостри

Се препорачува да се користат полипропиленски брисеви наместо брисеви со калциум алгинат или брисеви со дрвени столбови, бидејќи тие може да содржат супстанции кои деактивираат одредени вируси и го инхибираат PCR тестирањето.Не може да се користат брисеви со памучни глави, бидејќи памучните влакна имаат силна адсорпција на протеини и не се лесно излачувани во последователниот раствор за конзервација.

Во „Техничките спецификации за 10-во-1 мешано собирање и откривање на нови нуклеински киселини од коронавирус“, јасно е пропишано дека „тампонот за земање мостри треба да биде изработен од полиестер, најлон и други непамучни и некалциумски алгинат материјали, а рачката треба да биде изработена од недрвен материјал.Точката на кршење е околу 3 см од врвот на главата на тампонот, што лесно се крши“.

ЦДЦ во Соединетите Држави исто така спомена „Користете само брисеви од синтетички влакна со пластични или жичени вратила.Не користете брисеви со калциум алгинат или брисеви со дрвени шахти,бидејќи може да содржат супстанции кои деактивираат некои вируси и го инхибираат PCR тестирањето.

Во моментов нашироко се користи стерилен најлон за еднократна употреба, комбиниран со пластична прачка.Тампонот за собирање има подобра апсорпција на вода и брзина на ослободување.Според различни места за земање примероци, главата на брис има и различни големини и влакна.Дебелината.”

3. Решение за зачувување на транспортниот примерок

Раствор за зачувување на инактивација на вирусот: соодветна количина на концентрација на сол на гванидин и разновидни компоненти за лиза на вирусот може директно да го лизираат вирусот за ослободување на нуклеинска киселина, да ги инактивираат RNase и DNase и да обезбедат интегритет на нуклеинската киселина, која може да се користи за последователно детекција на qPCR.Не може да се користи за одгледување и изолација на вируси.

Раствор за транспорт и зачувување на вирусот: содржи соли, амино киселини, витамини, гликоза и протеини потребни за опстанок на вирусот, кои можат да ја одржат активноста на вирусот.Може да се користи за екстракција на нуклеинска киселина и откривање на вирусот во иднина, а може да се користи и за одгледување и сепарација на вирусот.

4. Цевка за зачувување на примероци и кеса за примероци

Цевката за складирање на примерокот треба да биде стерилна пластична цевка со заврткана капа што не адсорбира нуклеинска киселина.Секоја цевка за примерок треба да биде покриена со кеса за примерок за да се спречи истекување и контаминација на примерокот.

III.Супстанции кои мешаат во примерокот

Мешачки супстанции во експериментите со PCR

1. ендогени интерферентни

Супстанциите присутни во примерокот од телото може да го попречат откривањето на други супстанции.

Крв:хем (> 1mg/ml), хемин (>0,1ng/μl), триглицериди, IgG итн.;

Урина:Уреа (20 mM);

Столче:растителни полисахариди, холати;

Ткиво:протеаза, колаген;

Млеко: протеаза, јон на калциум;

Дрога: антибиотици, антивирусни лекови, хормони итн.

други.

2. егзоген интерферент

Доаѓа од супстанции кои можат да го попречат откривањето на други супстанции ин витро.Примерочни адитиви и супстанции со кои може да се контактира при собирањето и обработката на примерокот:

Тест залихи: серумски гел за сепарација, сад за собирање примероци и гумен затворач, катетер, течност за испирање на катетер, прашок за ракавици итн.

Антикоагулант: хепарин (>0,1 U/mL), EDTA (>0,5 mM), итн.;

Органски растворувачи: изопропанол (>0,1 IU/ml), бетаин, диметилсулфоксид, формамид, глицерин, PEG итн.;

Средства за дезинфекција: алкохоли (етанол>1%), алдехиди, феноли (фенол>0,2%), пероксиди, силни киселини (HCL), силни алкалии (NaOH) итн.;

Детергент:СДС (>0,005%);

Почва: Хумус

Боење: Индиго

други.

При реални услови за земање примероци на отворено, како што е собирање примероци од животната средина, примероците може да содржат различни супстанци кои пречат, а составот на супстанците кои пречат на секоја локација е различен, што бара експериментите за интерференција на PCR да се спроведат според локалните услови.

IV.Услови за складирање и транспорт на примероци

Свежо собраните клинички примероци треба да се испратат во лабораторија во рок од 2 до 4 часа по собирањето на 2°C до 8°C.Да се ​​чува на 4℃ во рок од 24 часа.Примероците што се користат за изолација на вирусот и откривање на нуклеинска киселина треба да се тестираат што е можно поскоро.Примероците кои можат да се тестираат во рок од 24 часа може да се чуваат на 4°C;Примероците што не можат да се откријат во рок од 24 часа треба да се чуваат на -70°C или пониско (ако не- Да се ​​чува на 70°C во фрижидер на -20°C).

Резиме:Стандардизираното собирање, транспортирање и складирање на примероците се од суштинско значење за последователно тестирање.Лажните негативи на многу лабораториски тестови се предизвикани од неправилно собирање, транспортирање и складирање на примероците што доведуваат до деградација на вирусната нуклеинска киселина.Сепак, многу лаборатории сè уште ја игнорираат важноста на земање мостри.Се надевам дека овој напис може да го разбуди вниманието на сите за земање примероци и да направи понаучно и разумно земање примероци!

Поврзан производ:

Комплет за откривање на нуклеинска киселина со варијанта SARS-CoV-2 (I) (Метод на мултиплекс ПЦР флуоресцентна сонда) - за откривање на мутанти од Бразил, Јужна Африка и ОК