Широко се користи ензимот Taq со топол почеток.Во споредба со обичната ДНК полимераза, ензимот Taq со топол почеток може ефикасно да избегне одредено неспецифично засилување и формирање на димери на прајмер и може ефикасно да ја подобри стапката на успех на засилување на целниот ген.Особено во полето на генетско тестирање, ензимот Taq со жешка стартување е идентификуван како задолжителен стандард во индустријата и не треба да се користи обична ДНК полимераза.Како што може да се види од горенаведеното, широко се користат Taq ензимите со топла почеток.Во моментов, на домашниот пазар има многу марки на ензими со топол почеток Taq, но нема многу ензими со висок квалитет со висок почеток.Соочени со толку многу ензимски производи на Taq, како треба да избереме?

1. Изберете го ензимот за жешко стартување Taq со висока ефикасност на засилување

Ефикасноста на засилување на PCR е тесно поврзана со перформансите на ензимот Taq.Откако ќе се оптимизира добар систем за ензимска реакција Taq, ефикасноста на засилување е над 95%, а опсегот на засилување на почетната количина на шаблонот е широк.Задоволително засилување може да се добие кога содржината на целниот ген е ниска и не е лесно да се отруе кога количината на шаблонот е висока, а експоненцијалниот период на засилување е долг.За ензимот Taq со слаби перформанси, дури и ако системот за реакција е оптимизиран многу пати, ефикасноста на засилување е сè уште помала од 90%, обликот „S“ на кривата на засилување не е очигледен, наклонот е мал, а кривата е рамна.Кога количината на шаблонот е мала, таа не може да се засили, а кога количината на шаблонот е висока, ефектот на засилување не е идеален.Затоа, изборот на ДНК полимерази со висока ефикасност на засилување е од клучно значење за успехот на PCR и qPCR.

2. Изберете ензим за жешко стартување Taq со силна ензимска моќ

Ензимската моќ на ензимот Taq е поврзана со ефикасноста на засилување.Општо земено, колку е посилна ензимската моќ на ензимот Taq со топол почеток, толку е подолг периодот на експоненцијален раст на PCR засилување, толку е потипична крива во облик на S, толку е поголема вредноста на флуоресцентниот сигнал и посоодветна за детекција на мултиплекс PCR.Марка ДНК полимеразите со слаба ензимска моќ генерално можат да поддржат само 2-плекс реакции.Кога се прават 3-плекс реакции, кривата на засилување е ниска, вредноста на флуоресцентниот сигнал е ниска и нема типична крива на засилување, така што резултатите тешко се оценуваат.

3. Изберете Taq ензим со жешко стартување со висока чувствителност

Општо земено, ДНК полимеразата има висока ефикасност на засилување и висока чувствителност, но има и недоследности.Ако изобилството на целниот ген на примерокот што треба да се засилува е ниско, се препорачува да се тестира чувствителноста на засилување на ензимот Taq.Најчестиот метод за откривање е да се изврши 10-кратно или 5-кратно градиентно разредување на плазмидниот фрагмент на целниот ген, да се спроведе детекција на PCR на пониско разредување и да се избере ензимот Taq за топол почеток со поголема чувствителност на детекција.

Од горенаведеното може да се види дека истражувачите треба да изберат според нивните сопствени експериментални барања и услови за финансирање.Најдобро е да се направи експеримент за засилување со разредување со градиент за да се открие ефикасноста на засилувањето и чувствителноста на ензимот Taq со топол почеток.

Пример за Foregene's Taq DNA полимераза:

Foreasy HS Taq DNA полимераза

Опис

Foreasy HS Taq DNA Polymerase е ДНК полимераза изразена во инженерската бактерија на Escherichia coli со технологија на рекомбинација на гени.Ензимот е комбиниран со уникатен реакционен пуфер, што го прави производот високо отпорен и компатибилен и може директно да го користи примерокот лизат (систем Foregene Lysis) како шаблон за реакции за откривање.

Апликација

Квалитативно PCR и квантитативно PCR откривање на прочистени шаблони и непрочистени шаблони.

Контрола на квалитет

1.Не е откриена активност на егзогена нуклеаза

2.ПЦР метод за откривање на резидуална геномска ДНК без домаќин

3. Може ефикасно да ги засили гените од една копија во човечкиот геном

4. Чувајте на собна температура една недела, неочигледни промени во активноста

Детали за производот: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/