Градење на СОП систем

Воспоставете ПЦР експеримент SOP за стандардизирање на однесувањето на персоналот во експериментот.

Експериментаторите строго се придржуваат до оперативните процедури и го минимизираат PCR загадувањето што може да биде предизвикано од човечки фактори или да спречат појава на загадување во операцијата.Дополнително, експериментаторот треба да има соодветно професионално знаење и вештини, вклучително и познавање на ракување со поврзаната опрема, разјаснување на целиот работен процес, совладување на методите за третман на контаминација и методи за контрола на квалитетот во лабораторија и да може правилно да ги толкува резултатите од тестот.

Градежна стандардна PCR лабораторија

ПЦР лабораторијата е поделена на четири области во принцип, имено област за подготовка на реагенс, област за обработка на примероци, област за засилување и област за анализа на производот за засилување.Првите две области се области пред засилување, а последните две области се пост-засилувачки области.Зоната пред засилување и зоната по засилување треба да бидат строго одделени.Експерименталните материјали, реагенсите, хартијата за снимање, пенкалата, материјалите за чистење итн. можат да течат само од областа пред засилување во областа по засилување, односно од областа за подготовка на реагенсот, областа за обработка на примерокот, областа за засилување и областа за анализа на производот за засилување и не смеат да течат во обратна насока.Протокот на воздух во лабораторијата, исто така, треба да тече од областа пред засилување до областа по засилување, а не во обратна насока.

Намалете ги експерименталните чекори

Ако лабораторијата врши само PCR детекција и идентификација, се препорачува да се користи флуоресцентна квантитативна PCR наместо конвенционална PCR.

Резултатите од квантитативната PCR детекција на флуоресценција може да се соберат и анализираат со флуоресцентни сигнали, така што нема потреба да се отвора капакот за електрофореза по реакцијата, со што се избегнува контаминација на производите на PCR предизвикани од истекување на реакционите производи за да се формираат аеросоли.Ако го зголемите бројот на отвори на капачињата за време на чекорот на вчитување на електрофорезата на гел, веројатно ќе дојде до контаминација на аеросол.Се препорачува да се промовира примената на квантитативна PCR и постепено да се замени квалитативната PCR.

Усвојување на UNG систем против загадување

За реакцијата на PCR се користи UNG системот за контаминација на производи против PCR.

Системот користи dUTP наместо dTTP.По реакцијата на PCR, сите PCR производи (фрагменти од ДНК) се инкорпорирани со dUTP;во следниот круг на PCR реакција, UNG ензимот додаден во системот се инкубира на 37°C 5 минути пред PCR, што може да биде специфично Разградете ги сите ДНК фрагменти што содржат dUTP, а потоа извршете PCR реакција.Ова може целосно да ја отстрани аеросолната контаминација предизвикана од производите на PCR.Ефектот е прикажан на сликата подолу:

Забелешка: За директната серија PCR, можете да ги изберете сериските производи од системот за загадување на производи против PCR на FJ Biotech

Предложете

За лаборатории кои спроведуваат големи тестови за генотипизација, силно се препорачува да се користи UNG системот за контаминација на производите против PCR за тестирање на реагенси, покрај изградбата на разумни лаборатории.

Потсетник: Употребата на овој систем не може да ја отстрани контаминацијата на производот со PCR што е веќе предизвикана.Затоа, UNG системот треба да се користи на почетокот на релевантниот тест, а системот UNG секогаш треба да се користи за PCR засилување, за да се спречи контаминација на PCR производите.Лажно позитивен.

Се препорачува да се користи системот Direct PCR-UNG на Forge Biotech при спроведување на големи тестирања, како што се: Комплет за директен PCR на растенијата-UNG;

Комплет за директно PCR за семе од растенија-UNG;

Комплет за директно PCR за животинско ткиво-UNG;

Комплет за директна PCR опашка на глувчето-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Оваа серија на комплети од Foregene не само што може да изврши PCR откривање брзо и во голем обем, туку и ефикасно да ја спречи и контролира контаминацијата на производите со PCR.