1: Заменете ги експерименталните резерви на време

Поставете (NTC) негативна контрола и повторете ја многу пати.Откако ќе се открие дека има контаминација на PCR производ во лабораторијата, навреме заменете ги сите експериментални материјали.Како што се: повторно разредете и подгответе ги прајмерите, повторно стерилизирајте го врвот на пипетата, EP цевката, ddH2O итн., заменете ја со нова пипета и привремено позајмувајте други лаборатории за изведување на PCR експерименти.Контаминираната лабораторија треба да се вентилира и да се зрачи со ултравиолетови зраци додека не се елиминира контаминацијата на производот PCR пред да се продолжи со експериментот.

2: Продолжете го времето на изложеност на УВ

Вреди да се напомене дека за да се отстрани контаминацијата со ДНК, редовното ултравиолетово зрачење треба да се продолжи за 2 часа од вообичаеното.И покрај тоа, ефектот на УВ зрачењето за отстранување на мали фрагменти (под 200 bp) од контаминација на ДНК сè уште не е добар.

Ултравиолетова бранова должина (nm) е генерално 254/300 nm, и доволно е да се зрачи 30 минути.Треба да се забележи дека при изборот на УВ за елиминирање на контаминацијата на преостанатите производи на PCR, треба да се земе во предвид должината на производот на PCR и распределбата на базите во низата на производот.УВ зрачењето е ефективно само за долги фрагменти над 500 bp и има мал ефект врз кратките фрагменти.

За време на УВ зрачење, пиримидинските бази во PCR производот ќе формираат димери.Овие димери може да го прекинат проширувањето, но не сите пиримидини во синџирот на ДНК можат да формираат димери, а УВ зрачењето исто така може да ги скрши димерите..Степенот на формирање на димери зависи од UV брановата должина, типот на пиримидинскиот димер и низата нуклеотиди во непосредна близина на местото на димерот.Затоа, ако фрагментите засилени со PCR се мали, се препорачува да се користи UNG системот за контаминација на производот против PCR.

3: Најчесто користени средства за чистење на ДНК загадувањето

Аеросолите лесно се создаваат кога се додаваат пипети, што е тешко да се избегне и брзо ќе се смири.Затоа, несомнено е добар избор често да се користат специјални средства за чистење на ДНК загадувањето за да се спречи ширењето на загадувањето со ДНК.

4:Користете UNG систем против загадување

Откако ќе се отстрани контаминацијата на производот со PCR, лабораторијата за тестирање може да го користи UNG системот за контаминација на производот против PCR за да спречи контаминација на производот PCR.Во општите лаборатории, можете да извршите едноставни експериментални партиции, строго да ја одделите областа на производот PCR од другите области, да воспоставите одредени лабораториски правила и прописи и да спроведете релевантна обука за да спречите појава на контаминација на производот PCR.

Препораки: Воспоставување разумна PCR лабораторија, одржување на добра PCR средина, формулирање на стандардни PCR оперативни процедури и негување на ригорозната оперативна свест на експериментаторите се клучот за спречување или намалување на загадувањето на PCR експериментите.