Вовед:

РНК, научно име рибонуклеинска киселина, нејзината кратенка доаѓа од RiboNucleic Acid, е вид на нуклеинска киселина формирана со поврзување на најмалку десетици рибонуклеотиди преку фосфодиестерски врски.

Премисата за истражување на РНК е да се извлече вкупната РНК без загадување, а основниот принцип на екстракција на РНК може грубо да се сумира на следниов начин:

1. Прво нарушете ги клетките

2. Потоа отстранете ги макромолекуларните нечистотии (протеини, липиди, ДНК итн.)

3. Конечно, РНК се таложи додека се отстрануваат солите и органските растворувачи и дополнително се прочистува РНК

Минатото и сегашноста на методот на екстракција

Првата генерација на метод за екстракција на РНК е методот на таложење ТРИзол (реагенси кои се користат вклучуваат гванидин изотиоцијанат, фенол, хлороформ итн.) измислен од дедо по име Пјотр Чомчински и баба Николета Саки, бидејќи овој изум овозможува екстракција на РНК Брзо и лесно, оттогаш започнало истражувањето на РНК.

Подоцна, дедо го продаде овој патент на Инвитроген, а Инвитроген го промовираше овој метод во светот и стана широко користен метод.

Подоцна, Инвитроген беше купен од Термо!

Репрезентативен производ: ТРИзол реагенс на Инвитроген

Сепак, методот на таложење ТРИзол бара повеќекратно таложење и екстракција на РНК, а употребените реагенси се токсични и им треба долго време за да работат.

Затоа, се појави методот за прочистување со колона-ензим од втората генерација, со користење на мембрана од силика гел како специфичен материјал за адсорпција на нуклеинска киселина за да се максимизира обновувањето на РНК во примерокот додека се отстрануваат другите нечистотии.

Методот од втората генерација ја поедноставува операцијата врз основа на стабилни перформанси, го намалува факторот на ризик и ја подобрува ефикасноста на екстракцијата на РНК.

Репрезентативни производи: QIAGEN RNeasy и повеќето домашни производи

Сепак, и првата и втората генерација методи бараат употреба на DNase за отстранување на контаминацијата на ДНК, што носи одредени непријатности за следните експерименти низводно.Преостанатата ДНАза ќе ја намали ефикасноста на обратната транскрипција и ќе ја намали синтезата на cDNA на првата нишка, а со тоа ќе влијае на точноста на резултатите.

Затоа, методот на екстракција од третата генерација е оптимизиран врз основа на втората генерација.Експериментот не треба да додаде никакви ензими, а РНК лесно може да се добие само со две колони.

Колона 1: Колона за чистење на ДНК за чистење на ДНК

Колона 2: Колона само за РНК конкретно ја адсорбира и обновува РНК

Таквата едноставна операција не само што заштедува време, туку и го олеснува работењето на низводните експерименти!

Репрезентативни производи: QIAGEN RNeasy Plus иForegeneПроизводи од серијата за прочистување на РНК

(RNeasy Plus)

(на ФорџинКомплет за изолација на вкупна РНК на растенијата)

Кажи ти тивко!Комплетот за РНК на Foregene, исто така, претставува супер лесен за употреба RNase Eraser, кој може целосно да отстрани 400μg RNase на цврстата површина за 1 минута, без да додаде никакви токсични материи во човечкото тело!

Слика1: Табела за споредба на оперативниот процес

Производите на Foregene можат да ја завршат екстракцијата на РНК во само две песни, не правете другите да љубоморат на напредокот на вашиот експеримент!

Слика2:Eекспериментални резултати споредбена табела

Првата генерација (1: ТРИзол)

Втората генерација (2: RNeasy на QIAGEN)

Третата генерација (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Слика3: qPCR график (график на крива на засилување)

Првата генерација (зелено значи TRIzol -, црвено значи TRIzol +)

Втората генерација (небесно сино значи QIAGEN RNeasy-, црвено значи QIAGEN RNeasy +)

Третата генерација (сина значи QIAGEN RNeasy плус, зелена значи Foregene)

(Забелешка: qPCR графиконот „-“ покажува дека DNase не е додадена и контаминацијата на ДНК не е отстранета. Затоа, КТ е повисок и резултатот не е точен; „+“ покажува дека е додадена DNase и ДНК контаминацијата е отстранета, резултатот е точен)

Секоја техничка надградба значи дека операцијата на експериментот се развива во поедноставна и попријатна насока за корисниците.

Foregene има за цел да им помогне на повеќе научни истражувачи да заштедат експериментално време и трошоци, да добијат висококвалитетни експериментални резултати и заеднички да создадат повредни научни истражувачки достигнувања.