Комплет за изолација на вирусна ДНК и РНК Комплет за подготовка за прочистување на вирусна ДНК и РНК
Спецификации
50 подготовки, 200 подготовки
Комплет за изолација со екстракција за прочистување на нуклеинска киселина со вирусна РНК ја користи спин колоната и формулата развиени од Foregene, кои можат ефикасно да извлечат висока чистота и висококвалитетна вирусна РНК од примероци како што се плазма, серум, телесна течност без клетки и супернатант на клеточна култура.Комплетот специјално додава Линеарен акриламид, кој лесно може да фати мали количини на РНК од примероците.РНК-Само колона може ефикасно да ја поврзе РНК.Комплетот може да обработи голем број примероци во исто време.
Целиот комплет не содржи RNase, така што прочистената РНК нема да се разградува.Баферот viRW1 и пуферот viRW2 може да гарантираат дека добиената вирусна нуклеинска киселина нема протеини, нуклеаза или други нечистотии, што може да се користи директно за експерименти со молекуларна биологија низводно.
Компоненти на комплетот
| Линеарен акриламид |
| Бафер DRL |
| Бафер RW1, тампон RW2 |
| ddH без RNase2O |
| Колона на ДНК/РНК |
| Инструкции |
Карактеристики и предности
■ Работа на собна температура (15-25℃) во текот на целиот процес, без ледена бања и центрифугирање на ниска температура.
■ Комплетен комплет Без RNase, нема потреба да се грижите за деградација на РНК.
■ Висок принос на нуклеинска киселина: само ДНК/РНК Колоната и единствената формула можат ефикасно да ги прочистат ДНК и РНК.
■ Голем капацитет за обработка на примероци: секој пат може да се обработуваат примероци до 200 μl.
■ Брза брзина: лесна за ракување и може да се заврши во рок од 20 минути.
■ Безбедност: не е потребен органски реагенс.
■ Висок квалитет: прочистените фрагменти на РНК се со висока чистота, без протеини и други нечистотии и можат да задоволат различни експериментални апликации надолу.
Апликација за комплет
Погоден е за екстракција и прочистување на вирусна нуклеинска киселина во примероци како што се плазма, серум, телесна течност без клетки и супернатант на клеточна култура.
Работен тек
Дијаграм
Складирање и рок на траење
■ Овој комплет може да се чува 24 месеци под суви услови на собна температура (15-25℃);ако треба да се чува подолго време, може да се чува на 2–8℃.
■ Линеарниот раствор на акриламид може да се чува на собна температура 7 дена;по добивањето на комплетот, ве молиме извадете го и чувајте го на -20°C.
■ По додавање на Linear Acrylamide во Buffer DRL, може да се чува на 2-8°C до 48 часа.Ве молиме користете го готово решение.
Водич за анализа на проблеми
Следното е анализа на проблемите што може да се сретнат при екстракција на вирусна ДНК/РНК, со надеж дека ќе бидат корисни за вашите експерименти.Дополнително, за други експериментални или технички проблеми, освен инструкциите за работа и анализата на проблемите, имаме посветена техничка поддршка за да ви помогнеме.Доколку имате какви било потреби, ве молиме контактирајте не: 028-83360257 или е-пошта:
Tech@foregene.com.
Нема екстракција на нуклеинска киселина или низок принос на нуклеинска киселина
Обично има многу фактори кои влијаат на ефикасноста на обновувањето, како што се: содржина на нуклеинска киселина во примерокот, метод на работа, волумен на елуција итн.
Анализа на вообичаени причини:
1. Во текот на постапката беше извршена ледена бања или центрифугирање на ниска температура (4°C).
Предлог: Работете на собна температура (15-25°C) во текот на целиот процес, не правете ледена бања и центрифугирање на ниски температури.
2. Примерокот бил неправилно складиран или примерокот бил чуван предолго.
Препорака: Чувајте ги примероците на -80°C и избегнувајте повеќекратно замрзнување и одмрзнување;обидете се да користите свежо собрани примероци за екстракција на нуклеинска киселина.
3. Недоволна лиза на примерокот.
Препорака: Ве молиме проверете дали примерокот и работниот раствор за лиза се темелно измешани и инкубирани на собна температура (15-25°C) 10 минути.
4. Неправилно додавање на елуент.
Предлог: Осигурете се дека ddH2O без RNase е додаден по капка во средината на мембраната на колоната за прочистување и не паѓајте го на прстенот на колоната за прочистување.
5. Точниот волумен на апсолутен етанол не бил додаден во пуферот RW2.
Предлог: Ве молиме следете ги упатствата, додајте го точниот волумен на апсолутен етанол во Buffer RW2 и добро измешајте пред да го користите комплетот.
6. Несоодветен волумен на примерокот.
Предлог: 200µl од мострата се обработуваат за секои 500µl бафер DRL.Прекумерната обработка на примерокот ќе резултира со помал принос на екстракција на нуклеинска киселина.
7. Несоодветен волумен на елуирање или нецелосно елуирање.
Препорака: Волуменот на елуентот на колоната за прочистување е 30-50μl;ако ефектот на елуција не е задоволителен, се препорачува да се продолжи времето на собна температура по додавање на претходно загреан ddH2O без RNase, како на пример 5-10 мин.
8. Етанолот останува на колоната по миењето со пуфер RW2.
Предлог: Ако етанолот остане по центрифугирањето со пуфер RW2 2 минути, колоната може да се стави на собна температура 5 минути по центрифугирањето за целосно да се отстрани резидуалниот етанол.
Прочистената нуклеинска киселина се разградува
Квалитетот на прочистената нуклеинска киселина е поврзан со зачувувањето на примерокот, контаминацијата на RNase, работата и други фактори.Анализа на вообичаени причини:
1. Собраните мостри не беа навреме складирани.
Предлог: Ако примерокот не се искористи навреме по собирањето, веднаш чувајте го на -80°C на ниска температура.За екстракција на РНК, обидете се да користите свежо собрани примероци.
2. Соберете примероци и постојано замрзнувајте и одмрзнувајте.
Предлог: Избегнувајте замрзнување и одмрзнување (не повеќе од еднаш) за време на собирањето и складирањето на примероците, во спротивно ќе се намали приносот на нуклеинската киселина.
3. RNase се внесува во операционата сала или не се носат ракавици за еднократна употреба, маски и сл.
Препорака: Експериментите за екстракција на РНК најдобро се изведуваат во посебна оперативна сала за РНК, а лабораториската маса треба да се исчисти пред експериментот.
Носете ракавици и маски за еднократна употреба за време на експериментот за да избегнете деградација на РНК предизвикана од воведувањето на RNase во најголема мера.
4. Реагенсот бил контаминиран со RNase за време на употребата.
Препорака: Заменете го со нов комплет за изолација на вирусна ДНК/РНК за поврзани експерименти.
5. Цевките за центрифугирање и врвовите на пипетите што се користат за манипулација со РНК се контаминирани со RNase.
Предлог: Проверете дали цевките за центрифуга, врвовите на пипетите, пипетите итн. што се користат за екстракција на РНК се без RNase.
Прочистената нуклеинска киселина влијае на низводните експерименти
ДНК и РНК прочистени со колоната за прочистување, ако содржината на јони на сол и протеини се премногу високи, тоа ќе влијае на низводните експерименти, како што се: засилување на PCR, обратна транскрипција итн.
1. Елутираната ДНК и РНК имаат резидуални соли јони.
Предлог: Проверете дали е додаден точниот волумен на апсолутен етанол во пуфер RW2 и измијте ја колоната за прочистување двапати со брзината на центрифугирање наведена во упатството за работа;Изведете центрифугирање за да ја минимизирате контаминацијата со јони на сол.
2. Елутираната ДНК и РНК имаат остатоци од етанол.
Предлог: Откако ќе го потврдите миењето со Buffer RW2, извршете центрифугирање на празна цевка со брзината на центрифугирање во упатството за работа;ако сè уште има остатоци од етанол, можете да ја центрифугирате празната цевка и потоа да ја ставите на собна температура 5 минути за да ги отстраните остатоците од етанол во најголема мера.
Упатства за употреба:
Упатство за употреба во комплет за изолација на вирусна ДНК и РНК
