W: Brother, обратната транскрипција е завршена, и конечно последниот чекор – флуоресцентна квантитативна PCR!Еј, брат, што е квантитативна PCR во реално време?
M:PCR секогаш знаеш, нели?
W: Знаете, PCR е полимеразна верижна реакција и тоа е технологија која ја зголемува ДНК!
М: Речиси е... Тоа е технички метод за засилување на целната секвенца на повеќе од еден милион пати преку специфични прајмери, но ова само укажува на присуство или отсуство на целната низа и не може да ја одреди количината на почетниот шаблон.Флуоресцентна квантитативна PCR е технички метод развиен за да се реши овој проблем.PCR во реално време и PCR (qPCR) генерално се однесуваат на него.
З: Разликата од обичниот PCR лежи во квантификацијата на флуоресценцијата?
М: Да, односно, во фазата на продолжување на секој циклус на PCR, се открива интензитетот на флуоресцентниот сигнал, а почетната количина на шаблон може да се пресмета според промената на интензитетот на сигналот.
W: Се чувствува толку комплицирано!Дали треба сам да го пресметам ова?
М:Ова бара полека да учиш, најдобро е да можеш да го разбереш принципот.Сега можете прво да се фокусирате на вредноста на КТ, што е релативно интуитивен експериментален податок, а неговата големина одговара на големината на почетната количина на шаблон.Постојат и графикони како што се криви на засилување и криви на топење.Тие го имаат последниот збор за тоа дали вашиот експеримент е успешен или не.
В: О, брат.Потоа ќе го направам експериментот qPCR!
М: Обрнете посебно внимание да не додавате шаблони во областа на реагенсот, инаку вашата неискористена мешавина лесно ќе се контаминира!
В: Разбрав!

Комплет Easyᵀᴹ-SYBR Green I PCR во реално време

Поголема ефикасност, поголема специфичност
Висока чувствителност, добра компатибилност